| 别称
MIF2; BIP; GRP78; Immunoglobulin heavy chain-binding protein; Glucose Regulated Protein 78; Binding Immunoglobulin Protein; Endoplasmic reticulum lumenal Ca binding grp78
| HSPA5 简介
热休克70kDa蛋白5(HSPA5)也被称为结合免疫球蛋白(BiP),是一种由HSPA5基因编码的蛋白质。BiP是一种位于内质网(ER)腔内的HSP70分子伴侣,当新合成的蛋白质被转运到ER时,它与之结合,并将其保持在能够进行后续折叠和寡聚的状态。BiP也是易位机制的一个重要组成部分,并在逆向运输穿越ER膜的异常蛋白中发挥了作用,这些蛋白注定要被蛋白体降解。BiP在所有生长条件下都是一种丰富的蛋白质,但在导致未折叠多肽在ER中积累的条件下,其合成被明显诱导。BiP包含两个功能域:一个核苷酸结合域(NBD)和一个底物结合域(SBD)。NBD结合并水解ATP,SBD则结合多肽。
| 特异性
可检测样本中人的HSPA5,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度单位(ng/mL) |
20 |
10 |
5 |
2.5 |
1.25 |
0.62 |
0.31 |
0 |
OD值 |
2.3 |
1.65 |
1.06 |
0.56 |
0.29 |
0.17 |
0.11 |
0.05 |
校正OD值 |
2.25 |
1.6 |
1.01 |
0.51 |
0.24 |
0.12 |
0.06 |
- |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的人HSPA5,计算回收率
样本类型 |
范围 |
平均回收率 |
血清(n=8) |
84-101 |
96 |
血浆(n=8) |
92-105 |
102 |
细胞培养上清(n=8) |
96-108 |
105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度人HSPA5,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 |
回收率(%) |
血清 |
血浆 |
细胞培养上清 |
1:2 |
范围(%) |
84-95 |
88-96 |
90-110 |
平均回收率(%) |
91 |
93 |
96 |
1:4 |
范围(%) |
89-102 |
87-108 |
105-115 |
平均回收率(%) |
94 |
98 |
108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。
| ELISA操作视频
| ELISA操作前必读 / 下载