| 别称
FLH2; HPLH2; P1; PFP; Pore Forming Protein; Cytolysin; Lymphocyte pore-forming protein
| PF1 简介
穿孔素 1(Perforin-1)是一种蛋白质,是由 PRF1 基因编码。穿孔素是一种 形成孔的细胞溶解蛋白,存在于细胞毒性 T 淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细 胞(NK 细胞)的颗粒中。脱颗粒时,穿孔蛋白分子在钙调蛋白的帮助下转 移到目标细胞,钙调蛋白作为一种伴侣蛋白,防止穿孔蛋白降解。然后,穿 孔蛋白通过膜磷脂与靶细胞的质膜结合,而磷脂酰胆碱与钙离子结合,增加 穿孔蛋白与膜的亲和力。形成的孔允许亲凋亡性蛋白酶家族(称为颗粒酶) 被动扩散到目标细胞。
| 特异性
可检测样本中大鼠的PF1,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| 浓度(ng/mL) |
10 |
5 |
2.5 |
1.25 |
0.62 |
0.31 |
0.15 |
|
| OD值 |
2.22 |
1.56 |
0.92 |
0.63 |
0.42 |
0.25 |
0.18 |
0.08 |
| 校正OD值 |
2.14 |
1.48 |
0.94 |
0.55 |
0.34 |
0.17 |
0.1 |
- |
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康大鼠组织匀浆、细胞裂解液和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的大鼠PF1,计算回收率
| 样本类型 |
范围 |
平均回收率 |
| 组织匀浆(n=8) |
84-101 |
96 |
| 细胞裂解液(n=8) |
92-105 |
102 |
| 细胞培养上清(n=8) |
96-108 |
105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆、细胞裂解液和细胞培养上清中加入高浓度大鼠PF1,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
| 稀释比例 |
回收率(%) |
组织匀浆 |
细胞裂解液 |
细胞培养上清 |
| 1:2 |
范围(%) |
84-95 |
88-96 |
90-110 |
| 平均回收率(%) |
91 |
93 |
96 |
| 1:4 |
范围(%) |
89-103 |
87-108 |
105-115 |
| 平均回收率(%) |
94 |
98 |
108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。
