| 别称
Polyhistidine-tag
| Polyhistidine-tag 简介
组氨酸标签 (Polyhistidine-tag)是蛋白质中的一个氨基酸主题,通常由至少 六个组氨酸(His)残基组成,通常位于蛋白质的 N 端或 C 端。它也被称为 六组氨酸标签、6xHis 标签、His6 标签。该标签由罗氏公司发明。一般来说, 蛋白质或多或少都具有在其表面协调金属离子的能力,利用其亲和力的不同, 可以用色谱法分离蛋白质。
| 特异性
可检测样本中的Polyhistidine-tag,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| 浓度(ng/mL) |
800 |
400 |
200 |
100 |
50 |
25 |
12.5 |
0 |
| OD值 |
0.216 |
0.298 |
0.417 |
0.669 |
0.955 |
1.405 |
1.79 |
1.865 |
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康细胞裂解液、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的Polyhistidine-tag,计算回收率
| 样本类型 |
范围 |
平均回收率 |
| 细胞培养上清(n=8) |
97-108 |
105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康细胞裂解液、细胞培养上清中加入高浓度Polyhistidine-tag,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
| 稀释比例 |
回收率(%) |
细胞培养上清 |
| 1:2 |
范围(%) |
90-110 |
| 平均回收率(%) |
96 |
| 1:4 |
范围(%) |
105-115 |
| 平均回收率(%) |
110 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。
