用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化 H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。